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https://hdl.handle.net/10316/522
Title: | Interacção da calmodulina com membranas sinápticas : efeito de trifluoperazina | Authors: | Alface, João Inácio Sardinha | Keywords: | Bioquímica; Calmodulina; Trifluoperazina; Membranas sinápticas | Issue Date: | 23-Feb-1988 | Citation: | ALFACE, João Inácio Sardinha - Interacção da Calmodulina com Membranas Sinapticas - Efeito de Trifluoperazina. Coimbra: ed. do autor, 1988. 198 p. | Abstract: | A calmodulina (CaM) é uma proteína multifuncional que liga Ca2+ e medeia acções do cálcio no metabolismo dos nucleótidos cíclicos, fluxos de Ca2+, fosforilação de proteínas, regulação do citoesqueleto e neurotransmissão, assim a identificação dos locais de ligação da CaM é essencial para compreender a regulação dos sistemas biológicos pelo Ca2+. A ligação do Ca2+ à CaM induz a exposição dum domínio hidrofóbico responsável pela interacção da CaM com proteínas alvo e fármacos. A CaM bovina foi purificada com elevado rendimento (100mg/Kg de cortex cerebral) por um método rápido que envolve: homogeneização, tratamento pelo calor a 100ºC, cromatografia em DEAE-celulose a pH 7,5 e 5,5, precipitação isoeléctrica (pH =4) na presença de (NH)4)2SO4 a 50% de saturação e cromatografia em «Sephadex» G-100. Neste trabalho, o ensaio biológico da CaM baseado na estimulação da (Ca2+ +Mg2+ ) ATPase das membranas dos eritrócitos, permitiu detectar a CaM a baixas concentrações (0,6 µg/ml de ensaio) durante o processo de purificação. A CaM iodinada com o reagente de Bolton Hunter (125I –CaM) foi posteriormente utilizada, para a caracterizar em termos físico-químicos a ligação da 125I –CaM às membranas sinápticas (SPM) do cortex, do núcleo caudado e do cerebelo. Os resultados obtidos mostram que a 125 I-CaM interage com as proteínas membranares e depende fortemente da concentração de Ca2+ livre (pCa). A ligação da 125I-CaM às SPM a diferentes valores de pCa ( A trifluoperazina (TFP), um fármaco neuroléptico, inibe a ligação da 125I –CaM ás SPM das fracções membranares estudadas. A inibição não é específica e poderá ser devida, para além de interacção directa de TFP com CaM, à interacção da TFP com as proteínas e lípidos membranares. | Description: | Tese de doutoramento em Farmácia (Bioquímica) apresentada à Fac. de Farmácia da Univ. de Coimbra | URI: | https://hdl.handle.net/10316/522 | Rights: | embargoedAccess |
Appears in Collections: | FFUC- Teses de Doutoramento |
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