Reparação génica de iPSC através do sistema CRISPR/CAS9

Abstract

As células estaminais pluripotentes induzidas (iPSC) constituem uma importante fonte celular para terapias personalizadas. Estas células podem ser geneticamente modificadas e diferenciadas em várias linhagens celulares, abrindo portas para o tratamento de doentes por transplantação autóloga. O recente desenvolvimento do sistema de defesa imunitário bacteriano CRISPR/Cas9 (Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeat/CRISPR-associated nuclease 9), como metodologia de reparação génica em mamíferos, promete facilitar a manipulação do genoma de iPSC humanas. Trata-se de um método simples, eficiente e de baixo custo que oferece várias vantagens sobre as tecnologias de reparação génica já existentes. A baixa eficiência de reprogramação de iPSC, o risco de mutagénese devido a efeitos fora do alvo causados pelo sistema CRISPR/Cas9, bem como outros problemas relacionados com estas tecnologias, têm limitado a sua aplicação na prática clínica. A aplicabilidade destas ferramentas em humanos justifica a realização de estudos de segurança mais amplos, que permitam compreender e superar as dificuldades que atualmente se apresentam. Ainda assim, estas tecnologias constituem um novo e promissor paradigma para entender e tratar a doença.

Induced pluripotent stem cells (iPSC) are an important cellular source for customized therapies. These cells can be genetically modified and differentiated into several cell lines, opening doors for the treatment of patients by autologous transplant. The recent development of bacterial immune defense CRISPR/Cas9 system (Clustered Regularly interspaced Short Palindromic Repeat/CRISPR-associated nuclease 9) as gene repair methodology in mammals, promises to improve the precise manipulation of the genome of human iPSC. This is a simple, efficient and low cost method which provides several advantages over gene repair existing technologies. The low efficiency of iPSC reprogramming, the risk of mutagenesis due to off-target effects caused by CRISPR/Cas9 system as well as other issues related to these technologies, have limited its application in clinical practice. The applicability of these tools in humans justify the realization of broader safety studies that allow understand and overcome the difficulties that currently arise. Still, these technologies are a promising new paradigm for understanding and treating disease.