Role of A₂A adenosine receptors on catecholamine release from mouse adrenal gland using a perfusion system

Abstract

As glândulas supra-renais estão localizadas em cima de cada rim e são compostas por duas zonas funcionalmente distintas: a medula, ocupando uma posição central, e o córtex, na periferia. A medula da glândula supra-renal é constituída maioritariamente por células cromafins que são responsáveis pela libertação de catecolaminas (dopamina, adrenalina e noradrenalina) por exocitose. Os receptores de adenosina pertencem à superfamília de receptores acoplados à proteína G e são considerados quatro diferentes subtipos: A1, A2A, A2B, e A3, tendo em conta diferenças na estrutura molecular e perfil farmacológico. O papel dos subtipos de receptores de adenosina - A1, A2A, A2B, A3 – na glândula supra-renal e a sua distribuição são factos que ainda não são claros. Alguns estudos tentaram elucidar estes aspectos, mas muito continua ainda desconhecido. No presente trabalho foi possível localizar os receptores de adenosina A2A na medula da glândula supra-renal por imunohistoquímica. Foi realizada a optimização de um Sistema de Perfusão usando glândulas supra-renais de murganho possibilitando um estudo mais fisiológico da libertação de catecolaminas da glândula supra-renal de murganho. Utilizando este Sistema de Perfusão os resultados obtidos sugerem que o receptor de adenosina A2A tem efeito estimulatório na libertação de catecolaminas (adrenalina e noradrenalina) induzida pela nicotina na glândula supra-renal de murganho uma vez que o CGS 2160, agonista dos receptores de adenosina A2A, aumenta a libertação de catecolaminas mediada pela nicotina enquanto o SCH 58261, antagonista dos receptores de adenosina A2A inibiu o efeito. Em resumo, este estudo fornece uma nova ligação entre as células cromafins e os receptores de adenosina, usando o protocolo alternativo de Sistema de Perfusão.

Adrenal glands are located above each kidney and are composed by two distinct functional zones, in a general classification: medulla, in a central position, and cortex, in the periphery. Adrenal medulla is mostly composed by chromaffin cells that are responsible for catecholamine release by exocytosis (dopamine, epinephrine and norepinephrine). Adenosine receptors belong to the superfamily of G protein-coupled receptors and four different subtypes of receptors are considered: A1, A2A, A2B, and A3, according to differences in molecular structure and pharmacological profile. The role of adenosine receptors subtypes - A1, A2A, A2B, A3 - in adrenal gland and their distribution are still not clear. Some studies tried to elucidate these aspects but a lot remains unknown. In the present work it was possible to localize the A2A adenosine receptors in mouse adrenal medulla by immunohistochemistry. It was performed the optimization of a Perfusion System using mouse adrenal glands leading to a more physiological study of catecholamine release by mouse adrenal gland. Using this Perfusion System results suggest that A2A adenosine receptor has a stimulatory effect on catecholamine release (epinephrine and norepinephrine) induced by nicotine from mouse adrenal gland since CGS 21680, adenosine receptors A2A agonist, enhances catecholamine release mediated by nicotine whereas SCH 58261, adenosine receptor A2A antagonist inhibited the effect. In summary, this study provides a new link between chromaffin cells and adenosine receptors, using the Perfusion System alternative protocol.