Técnicas de Citogenética e Biologia Molecular no diagnóstico pré-natal no âmbito das malformações ecográficas e sinais ecográficos de alerta

Abstract

O Diagnóstico Pré-Natal (DPN) tem assumido um papel preponderante na deteção precoce de alterações genéticas no feto, com recurso a técnicas imagiológicas (nomeadamente ecografia) e técnicas citogenéticas e moleculares.A ciência e as tecnologias foram evoluindo ao longos dos anos e, com isso, surgiram inúmeras técnicas que têm contribuído para o estudo do genoma humano e um diagnóstico mais preciso. Dentro da área da citogenética, existem as técnicas de citogenética convencional e molecular e, dentro das técnicas de biologia molecular e genómica, encontram-se as técnicas: QF-PCR, MLPA, MS-MLPA, aCGH e NGS. Todas estas técnicas são essenciais para o estudo de alterações cromossómicas em diagnóstico pré e pós-natal.A citogenética fornece uma visão geral dos cromossomas e permite ver a sua disposição e organização e, por outro lado, a genómica permite visualizar o genoma de forma mais detalhada. Ambas as áreas têm as suas vantagens e limitações, podendo complementar-se entre elas. A escolha da/s técnica/s a utilizar depende da indicação clínica e do objetivo do estudo, com a finalidade de estabelecer uma relação genótipo-fenótipo e contribuir para um diagnóstico correto. O foco deste trabalho é abordar as técnicas de citogenética e biologia molecular e aplicar as diferentes metodologias em diversos casos clínicos, no âmbito das malformações ecográficas e sinais ecográficos de alerta, de modo a saber definir qual a melhor estratégia de estudo para cada caso, adquirir ferramentas laboratoriais e ser capaz de interpretar os resultados obtidos, elaborar relatórios clínicos e compreender os desafios do diagnóstico pré-natal, integrando todos os conceitos adquiridos no decorrer do mestrado.

Prenatal Diagnosis (PND) has assumed a leading role in the early detection of genetic alterations in the fetus, using imaging techniques (namely ultrasound) and cytogenetic and molecular techniques.Science and technologies have evolved over the years and, as a result, numerous techniques have emerged which contributes the study of the human genome and to a more accurate diagnosis. Within the field of cytogenetics, there are conventional and molecular cytogenetics techniques, and within molecular biology and genomics techniques, there are the following techniques: QF-PCR, MLPA, MS-MLPA, aCGH and NGS. All these techniques are essential for the study of chromosomal alterations in pre and postnatal diagnosis.Cytogenetics provides an overview of chromosomes and allows to see their arrangement and organization and genomics allows to visualize the genome in a more detailed way. Both areas have their advantages and limitations, and they can complement each other. The choice of technique/s to be used depends on the clinical indication and the objective of the study, in order to establish a genotype-phenotype relationship and provide a correct diagnosis.The focus of this work is to approach the techniques of cytogenetics and molecular biology and apply the different methodologies in several clinical cases, in the scope of echographic malformations and echographic warning signs, in order to know how to define the best study strategy for each case, acquire laboratory tools and be able to interpret the results obtained, prepare clinical reports and understand the challenges of prenatal diagnosis, integrating all the concepts acquired during the master's degree.