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https://hdl.handle.net/10316/84630
DC Field | Value | Language |
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dc.contributor.advisor | Boylan, Fabio | - |
dc.contributor.advisor | Cotrim, Maria Dulce Ferreira | - |
dc.contributor.author | Soares, Sabrina da Silva | - |
dc.date.accessioned | 2019-01-24T23:44:23Z | - |
dc.date.available | 2019-01-24T23:44:23Z | - |
dc.date.issued | 2018-07-25 | - |
dc.date.submitted | 2019-01-24 | - |
dc.identifier.uri | https://hdl.handle.net/10316/84630 | - |
dc.description | Dissertação de Mestrado em Farmacologia Aplicada apresentada à Faculdade de Farmácia | - |
dc.description.abstract | O presente estudo objetivou primeiramente a caracterização fitoquímica de Crateaegus almaatensis Pojark (CA), espécie endémica do Casaquistão utilizando cromatografia contra corrente de alta velocidade (HSCCC). As substâncias isoladas foram porteriormente identificadas por técnicas espectrométricas e investigadas para os potencias efeitos analgésicos, anti-inflamatórios e cardiovasculares. Inicialmente, a fração aquosa foi separada do extrato etanólico das folhas de CA. Depois disso, a fração foi submetida à HSCCC utilizando o sistema de solventes bifásico HEMWat na proporção 1:4:1:4, permitindo assim o isolamento de duas substâncias. Ressonância magnética nuclear (NMR) do 1H e do 13C (metanol deuterado- MeOD, 400/125MHz) permitiu a caracterização química das substâncias como quercetina 3-O-rhamnosído (quercitrina) e quercetina 3-O-β-galactosído (hiperosído). Posterior tratamento de uma das frações obtidas do HSCCC por coluna cromatografica de Sephadex LH-20 e cromatografia de camada delgada com placas preparativas possibilitou o isolamento de uma terceira substância, identificada como campferol 3-O-α-L-rhamnosído (NMR do 1H em MeOD). A quantificação das substâncias isoladas foi realizada por cromatografia com fase líquida de alta eficiência utilizando um sistema de gradiente de àgua acidificada com ácido ortofosfórico a 0,25% e metanol como fase móvel, obtendo os seguintes resultados: 0,94% de afzelina, 4,02% de quercitrina e 4,02% 1,82% de hiperosído. O extrato total (CAET) e a fase aquosa do extrato total (CAFA) nas doses de 10, 30 e 100mg/Kg, juntamente com as substâncias isoladas nas doses de 0,3, 1 e 3 mg/Kg foram avaliados em ensaios in vivo quanto à atividade antinociceptiva (modelo de dor aguda induzida por formalina e placa quente), atividade sedativa (avaliação locomotora espontânea no campo aberto e forçada no rotarod), atividade anti-inflamatória (migração celular induzida por carragenina em bolsa de ar subcutâneo- SAP) e atividade vascular (modelo de contratilidade da artéria mamária interna humana- HIMA). Não foi possível observar atividade antinociceptiva e sedativa a partir dos extratos e substâncias isoladas de CA nas doses utilizadas neste estudo. CAFA na dose de 100mg/Kg i.p. diminuiu significativamente a contagem de leucócitos totais nos lavado da SAP e de medula óssea e dimininuiu a liberação de IL-1β no lavado da SAP. CAET nas concentrações de 0,014 e 0,14mg/ml no banho das artérias determinou um aumento significativo na contração máxima à noradrenalina. A curva concentração-resposta de CAFA (0,007 a 0,7mg/ml) apresentou atividade intrínseca de relaxamento de contração da HIMA. O potencial antiinflamatório e vascular demonstrado no presente estudo fundamenta a realização de trabalhos futuros com os extratos desta espécie, a fim de substânciar o uso medicinal da planta. | por |
dc.description.abstract | The present study aimed to achieve the phytochemical characterization of the endemic Kazakh species Crateaegus almaatensis Pojark. (CA) by using high speed counter current chromatography (HSCCC). The separation and later identification of the compounds was further achieved, which allowed the investigation of a potential analgesic, anti-inflammatory and cardiovascular activities for them as well as the extracts. Initially, the aquous fraction was separated from the leaves ethanol extract of CA. Thereafter, the fraction was submitted to HSCCC using the biphasic solvent system HEMWat (1:4:1:4), thus allowing for the isolation of two compounds. 1H and 13C nuclear magnectic resonance- NMR of the (Deuterated Metanol- MeOD, 400 / 125MHz) allowed the chemical characterization of quercetin 3-O-ramnoside (quercitrin) and quercetin 3-O-β-galactoside (hyperoside). By Sephadex LH-20 Chromatography (methanol) and Preparative Plate Thin Layer Chromatography (Acetic Ácid: Metanol: Water 3:1:1 mobile phase) a third compound could be separated from one of the previous HSCCC fractions and it was identified as kaempferol 3-O-α-L-Rhamnoside (1H-NMR in MeOD). The isolated compounds were quantified by high performance liquid chromatography using 0.25% orthophosphoric acid in water and methanol as solvents in a gradient system, achieving the following result: 0.94% of afzelin, 4.02% of quercitrin and 1.82% of hyperoside. The crude extract (CAET) and the crude extract aqueous fraction (CAFA) at the doses of 10, 30 and 100mg/Kg, together with the isolated compounds at the doses of 0.3, 1 and 3mg/Kg, intraperitonially administered (i.p.), were evaluated in vivo for their antinociceptive activity (acute pain induced by formalin and hot plate), sedative activity (spontaneous locomotion performance in the open field and forced locomotion performance on the rotarod), anti-inflammatory acitivity (cell migration carragenin induced in subcutaneous air punch- SAP) and vasoactive activity (human internal mamary artery- HIMA contractility). It was not possible to show antinociceptive and sedative activity for CA extracts and its isolated compounds in the doses used in this study. CAFA at the dose of 100 mg/Kg i.p. significantly decreased the total leukocyte count in the SAP and bone marrow wash samples. CAFA at the dose of 100mg/kg also decreased the IL-1β release in the SAP wash. CAET at the concentrations of 0.014 and 0.14 mg/ml in the organ bath significantly increased the maximum contractility response of HIMA to noradrenaline. The CAFA concentration-response curve (0.007 to 0.7mg/ml) has shown a significant intrinsic HIMA relaxation activity. The anti-inflammatory and vascular therapeutic potential demonstrated in the present study serves as a base for future works with this species, in order to substantiate the medicinal use of this plant. | eng |
dc.language.iso | por | - |
dc.rights | openAccess | - |
dc.rights.uri | http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/ | - |
dc.subject | Crataegus almaatensis | por |
dc.subject | Cromatografia contra-corrente de alta velocidade | por |
dc.subject | extrato | por |
dc.subject | flavonóides | por |
dc.subject | atividade | por |
dc.subject | Crataegus almaatensis | eng |
dc.subject | High speed countercurrent chromatography | eng |
dc.subject | extract | eng |
dc.subject | flavonoids | eng |
dc.subject | activity | eng |
dc.title | Perfil Químico e Farmacológico de Crataegus almaatensis: uma Planta Medicinal Asiática. | por |
dc.title.alternative | Chemical and Pharmacological profiling of Crataegus almataensis: a medicinal plant from Asia. | eng |
dc.type | masterThesis | - |
degois.publication.location | Faculdade de FArmácia da Universidade de Coimbra e Trinity College Dublin | - |
degois.publication.title | Perfil Químico e Farmacológico de Crataegus almaatensis: uma Planta Medicinal Asiática. | por |
dc.peerreviewed | yes | - |
dc.identifier.tid | 202158381 | - |
thesis.degree.discipline | Saude - Ciências Farmacêuticas | - |
thesis.degree.grantor | Universidade de Coimbra | - |
thesis.degree.level | 1 | - |
thesis.degree.name | Mestrado em Farmacologia Aplicada | - |
uc.degree.grantorUnit | Faculdade de Farmácia | - |
uc.degree.grantorID | 0500 | - |
uc.contributor.author | Soares, Sabrina da Silva::0000-0003-0088-0362 | - |
uc.degree.classification | 18 | - |
uc.degree.presidentejuri | Ramos, Fernando Jorge dos | - |
uc.degree.elementojuri | Reis, Flávio Nelson Fernandes | - |
uc.degree.elementojuri | Cotrim, Maria Dulce Ferreira | - |
uc.contributor.advisor | Boylan, Fabio | - |
uc.contributor.advisor | Cotrim, Maria Dulce Ferreira | - |
item.languageiso639-1 | pt | - |
item.openairecristype | http://purl.org/coar/resource_type/c_18cf | - |
item.grantfulltext | open | - |
item.fulltext | Com Texto completo | - |
item.cerifentitytype | Publications | - |
item.openairetype | masterThesis | - |
crisitem.advisor.researchunit | CNC - Center for Neuroscience and Cell Biology | - |
Appears in Collections: | UC - Dissertações de Mestrado |
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