Please use this identifier to cite or link to this item: http://hdl.handle.net/10316/82579
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dc.contributor.advisorMarto, Carlos Miguel Machado-
dc.contributor.advisorCândido, Mafalda Sofia Laranjo-
dc.contributor.authorTeles, Ana Filipa de Sousa-
dc.date.accessioned2018-12-20T04:24:30Z-
dc.date.available2018-12-20T04:24:30Z-
dc.date.issued2018-07-20-
dc.date.submitted2019-01-19-
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/10316/82579-
dc.descriptionTrabalho Final do Mestrado Integrado em Medicina Dentária apresentado à Faculdade de Medicina-
dc.description.abstractIntrodução: A pesquisa em Medicina Dentária regenerativa avançou significativamente, devido à identificação de células estaminais dentárias. Várias fontes de células estaminais são conhecidas, tanto de origem oral quanto sistémica. No entanto, a colheita dessas células apresenta algumas limitações, portanto, novas fontes de células estaminais são necessárias. A desdiferenciação de células orais adultas é uma metodologia que nosso grupo tem estudado. A influência do microambiente na diferenciação celular é conhecida, assim, a interação entre células estaminais e fibroblastos gengivais é de grande interesse em futuros procedimentos regenerativos.Objetivo: Este trabalho tem como objetivo avaliar a interferência dos meios condicionados de fibroblastos gengivais na viabilidade e diferenciação de células tipo estaminal.Métodos: Uma cultura primária de fibroblastos gengivais de murganho foi obtida por metodologia de explante e cultivada sob condições aderentes. Após a distribuição das culturas celulares por placas de múltiplos poços, foi realizado um protocolo de desdiferenciação de 4 dias para obter células do tipo estaminal. Estas células foram incubadas por 48 horas com o meio condicionado por várias concentrações de fibroblastos gengivais. A atividade metabólica, o teor de proteína e a quantidade de DNA foram avaliados pelos ensaios de MTT, SRB e cristal violeta, respetivamente. A morfologia das células diferenciadas foi avaliada por coloração com cristal violeta e May-Grunwald Giemsa. Alterações morfológicas da diferenciação de linhagem foram avaliadas com coloração de Alizarin Red, Alcian Blue e Oil Red O.Resultados: O meio condicionado por fibroblastos gengivais não alterou significativamente a atividade metabólica, os teores de proteína e DNA das células tipo estaminal. Todos os grupos apresentaram alterações morfológicas compatíveis com fenótipo tipo estaminal e foram observadas diferenças fenotípicas entre os grupos, mas não se verificou diferenciação osteogénica, condrogénica e adipogénica. Discussão / Conclusões: O tratamento com meio condicionado de fibroblastos gengivais garantiu a viabilidade celular, contudo não promoveu a diferenciação celular.por
dc.description.abstractIntroduction: Regenerative dentistry research has advanced significantly, much because of the identification of dental stem cells. Various sources of stem cells are known, both of oral and systemic origin. However, harvesting these cells poses some limitations, therefore, new sources of stem cells are needed. Dedifferentiation of adult oral cells is a methodology our group has been studying. Influence of microenvironment in cell differentiation is known, thus the interaction between stem-cells and gingival fibroblasts is of great interest regarding future regenerative procedures. Aim: This work aims to evaluate the interference of gingival fibroblast conditioned media in stem-like cells viability and differentiation. Methods: A primary culture of mouse gingival fibroblasts was obtained by explant methodology and cultured under adherent conditions. After plating, a 4-day dedifferentiation protocol was performed to obtain stem-like cells. These cells were incubated for 48 hours with media conditioned by several numbers of gingival fibroblasts. Protein content and DNA amount were evaluated by SRB and crystal violet assays, respectively. Differentiated cells morphology was evaluated by crystal violet and May-Grunwald Giemsa staining. The morphological alterations of the lineage differentiation were evaluated with Alizarin Red, Alcian Blue and Oil Red O staining.Results: Gingival conditioned media did not alter significantly the protein and DNA contents of stem-like cells. All groups show morphological changes compatible with stem-like phenotype and phenotypic differences were observed between groups, but there was no osteogenic, chondrogenic and adipogenic differentiation.Discussion / Conclusions: Treatment with gingival fibroblasts conditioned media ensured cell viability, however did not promote cell differentiation.eng
dc.description.sponsorshipFCT-
dc.description.sponsorshipFCT-
dc.language.isopor-
dc.relationinfo:eu-repo/grantAgreement/FCT/5876/147358/PT-
dc.relationinfo:eu-repo/grantAgreement/FCT/COMPETE/132965/PT-
dc.rightsclosedAccess-
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/-
dc.subjectCélulas estaminaispor
dc.subjectDesdiferenciaçãopor
dc.subjectDiferenciaçãopor
dc.subjectMedicina dentária regenerativapor
dc.subjectStem cellseng
dc.subjectDedifferentiationeng
dc.subjectDifferentiationeng
dc.subjectRegenerative dentistryeng
dc.titleA influência do microambiente da cavidade oral na diferenciação de células tipo estaminalpor
dc.title.alternativeOral microenvironment influence on stem-like cells differentiationeng
dc.typemasterThesis-
degois.publication.locationInstituto de Biofísica da Faculdade de Medicina da Universidade de Coimbra; iCBR, Coimbra Institute for Clinical and Biomedical Research-
degois.publication.titleA influência do microambiente da cavidade oral na diferenciação de células tipo estaminalpor
dc.peerreviewedyes-
dc.identifier.tid202049043-
thesis.degree.disciplineMedicina Dentária-
thesis.degree.grantorUniversidade de Coimbra-
thesis.degree.level1-
thesis.degree.nameMestrado Integrado em Medicina Dentária-
uc.degree.grantorUnitFaculdade de Medicina-
uc.degree.grantorID0500-
uc.contributor.authorTeles, Ana Filipa de Sousa::0000-0003-4889-5651-
uc.degree.classification20-
uc.degree.presidentejuriBotelho, Maria Filomena Rabaça Roque-
uc.degree.elementojuriPaula, Anabela Baptista Pereira-
uc.degree.elementojuriCândido, Mafalda Sofia Laranjo-
uc.contributor.advisorMarto, Carlos Miguel Machado::0000-0001-9269-5417-
uc.contributor.advisorCândido, Mafalda Sofia Laranjo-
item.fulltextCom Texto completo-
item.grantfulltextembargo_99991231-
item.languageiso639-1pt-
crisitem.advisor.orcid0000-0003-0689-6007-
Appears in Collections:UC - Dissertações de Mestrado
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