GLUT-1: um alvo terapêutico para os tumores primários do fígado?

Abstract

O cancro caracteriza-se por uma divisão celular descontrolada, constituindo o tumor não apenas um conjunto de células em proliferação, mas um tecido complexo composto por tipos celulares distintos que interagem entre si. Os tumores primários do fígado são lesões tumorais que têm origem neste órgão, e de entre eles, o carcinoma hepatocelular é o mais frequente, representando cerca de 80% das neoplasias primárias deste órgão. O segundo tumor primitivo do fígado mais comum é o colangiocarcinoma, constituindo cerca de 10% destes tumores. Estes tipos de tumores têm mau prognóstico e poucas alternativas terapêuticas. Nas últimas décadas a incidência dos tumores primários do fígado e a mortalidade decorrente dos mesmos tem aumentado consideravelmente, tornando imperativa a busca de novas formas de tratamento assim como de métodos de diagnóstico mais sensíveis e específicos para estes tipos de tumores. Alguns estudos têm salientado o papel do transportador de glicose 1 na tumorigénese do carcinoma hepatocelular, indicando-o como um possível alvo terapêutico. Apesar de existirem evidências da expressão acrescida deste transportador no colangiocarcinoma, nada se sabe acerca do seu potencial papel tumorigénico neste tumor. Assim, o principal objectivo deste trabalho foi avaliar o potencial do transportador de glicose 1 enquanto alvo terapêutico para o carcinoma hepatocelular e para o colangiocarcinoma. Para tal, utilizaram-se três linhas celulares humanas de carcinoma hepatocelular que diferem entre si na expressão de P53, e uma linha celular humana de colangiocarcinoma. Nas linhas celulares em estudo avaliou-se o potencial terapêutico de dois inibidores competitivos do transportador de glicose 1, a quercetina e o gossipol. Foi também avaliado o potencial deste transportador enquanto alvo terapêutico no carcinoma hepatocelular através da inibição genética do mesmo numa das linhas celulares de carcinoma hepatocelular. Para além disso foram realizados estudos de captação de 18F-FDG que serviram como método de confirmação da inibição competitiva do GLUT-1. Estudos recentes demonstraram que este radiofármaco é substrato para as proteínas relacionadas com a resistência multifármacos, pelo que se avaliou também o seu papel no estudo desta resistência, tentando-se estabelecer um paralelismo com os resultados obtidos com o 99mTc-MIBI, um radiofármaco utilizado na avaliação da resistência multifármacos. Neste estudo avaliou-se também o efeito de alguns fármacos comummente utilizados na clínica como terapêutica anticancerígena, nas linhas celulares estudadas, assim como o efeito combinado da quercetina e do gossipol com o sorafenib e a doxorrubicina. Para a concretização dos objectivos propostos foram utilizadas diversas técnicas de biologia celular e molecular como a inibição genética, citometria de fluxo, western blot, ensaio cometa, ensaio clonogénico ou o teste do MTT. Por outro lado efectuaram-se estudos de captação e retenção de radiofármacos. Os resultados obtidos dos estudos com quercetina e com gossipol, mostraram que, para as linhas celulares dos tumores primários do fígado em estudo, a incubação com os referidos compostos induziu uma inibição competitiva do transportador de glicose-1 e, por consequência, um decréscimo na captação de 18F-FDG e por analogia de glicose. Em resposta à privação glicolítica ocorreu a indução de stresse oxidativo o que, por consequência, conduziu a danos no ADN das linhas celulares em estudo, culminando num processo de morte celular, maioritariamente por apoptose, de um modo independente da P53. Através do tratamento combinado de quercetina e de gossipol com sorafenib ou doxorrubicina, obteve-se, na maioria das vezes, efeito sinérgico. A inibição genética do transportador de glicose 1 foi bem sucedida, tendo-se verificado também que a nova linha celular obtida possui menor actividade metabólica do que aquela que lhe deu origem, sendo também mais sensível aos fármacos comummente utilizados na prática clínica. Assim, os resultados indicam que, de facto, o transportador de glicose 1 poderá ter um papel activo na tumorigénese dos tumores primitivos do fígado, influenciando a sua sensibilidade à quimioterapia. Através dos estudos de cinética de radiofármacos observou-se que a expressão de P53 afecta a captação de 18F-FDG, e que mutações nesta proteína conduzem a uma maior taxa de captação do referido radiofármaco. Observou-se também a existência de um paralelismo entre a captação e a retenção de 18F-FDG e de 99mTc-MIBI, indicando estes resultados que o 18F-FDG pode ser utilizado no estudo da resistência multifármacos. Em suma, este trabalho constitui um ponto de partida para investigações futuras, uma vez que indica que o GLUT-1 poderá ser considerado um alvo terapêutico para os tumores primitivos do fígado, e ainda indica que a PET com recurso ao 18F-FDG poderá ser utilizada como método de prever a resposta à quimioterapia.