Biomarcadores em tumores das células germinativas

Abstract

Os TCG (tumores de células germinativas), tal como o nome indica, são originários de células germinativas primordiais, células que darão mais tarde origem aos espermatozoides nos homens e aos oócitos nas mulheres. As células germinais migram para as gónadas, mas podem ocorrer erros, e adquirirem localização extra-gonadal. A incidência de tumores de células germinativas está bem determinada, tanto no ovário como nos testículos, sendo a sua etiologia conhecida. No entanto, podem também ocorrer em localizações incorretas como é o caso do mediastino (corresponde ao espaço compreendido entre os dois pulmões, delimitado pela pleura mediastinal). O objetivo principal deste trabalho consistiu em estudar a morfologia destes tumores com recurso a imunohistoquímica, com diferentes e variados marcadores relacionados com a maturação e organogénese do embrião humano. Com a metodologia referida tentámos também estabelecer linhagens celulares no desenvolvimento tumoral, considerando as potencialidades das células durante o desenvolvimento embrionário dos seres Humanos. Como principais conclusões verificámos que o Oct3/4 (marcador de células pluripotentes) é diferente nos TCG seminomas e carcinomas embrionários (marcação nuclear no seminoma e nuclear e citoplasmática no carcinoma embrionário). A LP34 (citoqueratinas 5, 6 e 18), a Ck7 (citoqueratinas 7) e o TTF1 (marcador pulmonar) permitiram recapitular o desenvolvimento do aparelho respiratório, sabendo que há coincidência embrionária com o CDX2 considerando este marcador intestinal. E por fim, verificámos que o Nanog (marcador de células pluripotentes) só marca TCG muito indiferenciados, correspondendo assim a um marcador de células pluripotentes, o que nos permite pensar que a proteína Nanog se encontra expressa num estádio muito precoce do desenvolvimento embrionário dos indivíduos. O mesmo acontece com a vimentina que é expressa em TCG muito indiferenciados e deixa de ser expressa quando começa a organogénese. A vimentina é um marcador importante porque em tumores/carcinomas pouco diferenciados volta a estar expressa. O painel de anticorpos selecionado visou assim caracterizar a evolução de tecidos imaturos para tecidos maduros. Pudemos perceber a linhagem celular sob a qual diferentes tumores/carcinomas podem ser classificados, de acordo com os anticorpos específicos de células/tecidos adultos e/ou ainda através da marcação com anticorpos que caraterizam as células pluripotentes.

GCT (germ cell tumours) are originated from PGC (primordial germ cells), that are cells that will give rise to sperm in men, and oocytes in women. During embryonic development genetic or migration errors may occur, leading to an extra-gonadal localization of PGCs. The incidence of germ cell tumours is well established both on the male and female gonads, and ethologically well known. However they can occur in wrong locations such as the mediastinum. The main goal of this work was to study the morphology of these tumours using immunohistochemistry with a set of different markers related to the maturation and organogenesis of the human embryo. Moreover, with this methodology, we have tried to establish the cell lineage in tumour development. We found that Oct3 / 4 has differential staying in TCG seminomas and embryonic carcinoma (in the cell nucleus in seminomas, and in the cytoplasm and nucleus in embryonic carcinoma). LP34 (cytokeratin 5,6 and 18), CK7(cytokeratin 7) and TTF1 ( marker respiratory epithelium) allowed the recapitulation of the development of the respiratory system, knowing that it coincides with the embryonic CDX2 (intestinal marker). Finally, we found that Nanog only labels undifferentiated pluripotent cell in GCT. The same is true for vimentin, which is expressed on at a much undifferentiated stage and stops its expression when organogenesis begins. Vimentin is an important marker because in poorly differentiated tumours / carcinomas it is expressed again. The antibody panel selected aimed to characterize the evolution of immature to mature tissues. We could see the cell lineage under which several tumours / carcinoma can be classified in accordance with adult cells / tissues specific antibodies and / or with the labelling of antibodies that characterize pluripotent cells.