Nova abordagem no tratamento de tumores primários do fígado : o papel da quercetina

Abstract

Os tumores primários do fígado constituem um problema de importância global, uma vez que a sua incidência é crescente e as opções terapêuticas limitadas. Desta forma, torna-se imperativa a busca de novos alvos terapêuticos, assim como novas moléculas com potencial curativo para este tipo de tumores. O carcinoma hepatocelular (CHC) é o tumor primário do fígado mais comum, onde a expressão do transportador de glicose 1 se encontra aumentada, induzindo a tumorigénese. De igual forma, no colangiocarcinoma (CC), o segundo tipo de tumor primitivo do fígado mais comum, tem sido igualmente sugerido que apresenta um aumento da expressão deste transportador, embora não existam ainda evidências acerca do seu do potencial tumorigénico neste tipo de tumor. Os flavonoides, como a quercetina, são inibidores competitivos do GLUT-1 e podem constituir potenciais agentes terapêuticos extremamente úteis em tumores primários do fígado. De facto, são vários os estudos, em diversos tipos de cancro onde se tem verificado o efeito anticancerígeno da quercetina. Assim, este trabalho teve como principal objetivo avaliar o efeito anticancerígeno e de indução de morte celular da quercetina, como também avaliar o possível efeito sinérgico com o sorafenib em três linhas celulares humanas de CHC que diferem entre si na expressão da p53 (HepG2 (expressa a forma normal da p53), HuH7 (expressa uma forma mutada da p53) e Hep3B2.1-7 (não expressa p53)) e numa linha celular humana de CC (TFK-1). Em todas as linhas celulares em estudo demonstrou-se que a quercetina e o sorafenib apresentam eficácia ao nível da inibição da proliferação celular. Para além disso, foi possível verificar que ocorre sinergia no tratamento combinado destes dois compostos, para as linhas celulares de CHC, quando estes foram administrados simultaneamente. Em todas as linhas celulares, a quercetina induziu morte celular por apoptose, acompanhada de uma tendência para o aumento da razão Bax/Bcl-2 e aumento da paragem do ciclo celular na fase G0/G1 e na fase G2/M, verificando-se também uma diminuição da população em fase S. Para as linhas celulares de CHC, verificou-se um aumento da população em fase pré-G1. Foi possível verificar ainda as características anti-/pró-oxidantes da quercetina, havendo indicações de que o peróxido de hidrogénio possui um papel na toxicidade induzida por este composto. Os resultados X obtidos através da avaliação da expressão do GLUT-1 mostraram um aumento da expressão membranar deste transportador, acompanhado de uma diminuição citoplasmática do mesmo. Estes resultados entram em concordância com os resultados obtidos pelos estudos de captação de 18F-FDG, que apontam para uma inibição competitiva por parte da quercetina, inibição esta que parece estar intimamente relacionada com o efeito anticancerígeno deste composto.

Primary liver tumors are a problem of global importance, since the incidence is increasing worldwide and therapeutic options are limited. Thus, it becomes imperative find new therapeutic targets as well as new molecules with therapeutic potential for this type of tumors. Hepatocellular carcinoma (HCC) is the most common primary liver tumor, where expression of glucose transporter 1 (GLUT-1) is increased, leading to tumorigenesis. Cholangiocarcinoma (CC) is the second most common primary liver tumor and studies have demonstrated a higher expression of GLUT-1, however, there are no studies on the tumorigenic potential of GLUT-1 in this type or tumor. Flavonoids, such as quercetin are competitive inhibitors of GLUT-1 and may be potential therapeutic agents extremely useful in primary liver tumor. In fact, the anti-cancer effect of quercetin, has been observed where in various types of cancer, by several studies. So, the main objective of this study was the evaluation quercetin anticancer activity and induction of cell death effect, as well as the possible synergistic effect with sorafenib in three human HCC cell lines that differ in p53 expression (HepG2 (expressing the normal form of p53), Huh7 (expressing a mutated form of p53) and Hep3B2.1-7 (not express p53)) and a human CC cell line (TFK-1). It was found that for all cell lines studied, quercetin and sorafenib have anti-proliferative effect. In addition, it was possible to verify that occurred synergy when the two compounds were added simultaneously for all HCC cell lines. In all cell lines, quercetin induced cell death by apoptosis, followed by an increase in Bax/Bcl-2 ratio and an arrest in the G0/G1 and G2/M phases of cell cycle. It was also verified a decrease in population S phase. For HCC cell lines, there was also an increase in the pre-G1 population. From the obtained results it was also observed the importance of pro/anti-oxidants characteristics of quercetin, indicating that hydrogen peroxide can have an active role in the toxicity induced by this compound. The results obtained by evaluating the GLUT-1 expression showed an increased expression of this transporter at membrane, accompanied by a decrease in cytoplasm. These results are consistent with the results obtained through 18F-FDG uptake, which indicating a competitive inhibition of GLUT-1 by quercetin, this inhibition appears to be intimately related to the anti-cancer effect of this compound.