EFEITO DO SORO DE IDOSAS CONDICIONADO POR UM PROGRAMA DE 28 SEMANAS DE EXERCÍCIO AQUÁTICO NA TRANSFORMAÇÃO DE CÉLULAS DE CANCRO DO PULMÃO

Abstract

Since the 19th century, lung cancer has reached large-scale proportions that are alarming and of great concern around the world. Lung cancer is one of the leading causes of death in the world, with the greatest impact on males and the second greatest impact on females. Since the ageing process causes physiological changes, it was not advisable for elderly patients to undergo chemotherapy and radiotherapy, as these therapies were poorly tolerated and would consequently aggravate the problems associated with ageing.However, with the emergence of new therapies with a major impact on lung cancer, there have been increases in patients' life expectancy and quality of life. The adoption of healthy lifestyles such as not smoking, not consuming alcoholic beverages in an unhealthy way, complemented with regular physical exercise is associated with a lower risk of cancer. The aim of this study was to analyze the proliferation, clonogenic potential, collective migration capacity and metabolic phenotype of the A549 lung cancer cell line when exposed to culture medium containing serum from elderly women conditioned by 28-week aquatic training programs.Methodology: This study used the A549 cell line, maintained at a temperature of 37 ºC and with 5% (v/v) CO2/ 95% (v/v) air. The conditioned human serum used was collected at rest, before and after a physical exercise program in an aquatic environment. To assess cell transformation, we used various tests, including the lactate quantification test, which aimed to estimate the production of L-lactate over three hours in the media of cultures exposed to different serums conditioned by exercise. An increase in lactate concentration levels indicates an increase in lactic fermentation rates. The SRB assay made it possible to estimate cell density by measuring protein content, a density which can in turn be used to assess cell proliferation. The clonogenic assay assessed the ability of a single cell to develop a colony, allowing cell survival to be determined. Finally, the migration assay studied the migration of cancer cells in vitro.Results: No statistically significant differences could be seen in the effect of chronic exercise on cancer cells. However, a trend towards greater L-lactate production was observed in cultures exposed to sera obtained after the interventions, which seems to indicate a change in the bioenergetic phenotype. The trend in almost all groups was for an increase in L-lactate concentrations from M1 to M2. In the SRB assay, there was a tendency for cell density levels to decrease. In the clonogenic assay, there was a slight decrease in the ability to form colonies, but there were no statistically significant differences. In the migration test, there was an increase in the area of migration from M1 to M2 in the aerobic group, which was identical in the interval group. Conclusion: Although there were no significant differences between the cultures of A549 cells exposed to sera collected at the beginning or end of the exercise interventions, there were trends that may be clinically relevant, namely a decrease in the transformation of the cancer cell line and in the ability to form colonies.

Desde o século XlX que o cancro do pulmão tem vindo a alcançar proporções de grande escala, que são alarmantes e de grande preocupação em todo o mundo. O cancro do pulmão é das principais causas de morte no mundo, dos que tem mais impacto no sexo masculino e o segundo com mais relevância no sexo feminino. Uma vez que, o processo de envelhecimento provoca alterações fisiológicas, não era aconselhável que os pacientes idosos fossem submetidos à quimioterapia e radioterapia, pois estas terapias eram de baixa tolerabilidade e consequentemente agravariam os problemas associados ao envelhecimento. Porém, com o surgimento de novas terapias de grande impacto no cancro do pulmão, proporcionaram aumentos nosníveis de esperança e qualidade de vida dos doentes. A adoção de estilos de vida saudável como não fumar, não consumir bebidas alcoólicas desregradamente, complementada com a prática regular de exercício físico está associada a um menor risco de cancro. O objetivo deste estudo foi analisar a proliferação, o potencial clonogénico, a capacidade de migração coletiva e o fenótipo metabólico da linha celular de cancro do pulmão A549 quando exposta a meio de cultura contendo soro de idosas condicionado por programas de treino aquático de 28 semanas.Metodologia: Para a realização deste estudo foi utilizado a linha celular A549, mantida a uma temperatura de 37 ºC e com 5% (v/v) de CO2/ 95% (v/v) de ar. O soro humano condicionado utilizado foi recolhido em repouso, antes e depois de um programa de exercício físico em meio aquático. Para avaliar a transformação celular utilizámos vários ensaios nomeadamente, o ensaio de quantificação de lactato que teve como objetivo estimar a produção de L-lactato durante três horas nos meios de culturas expostas a diferentes soros condicionados por exercício. O aumento dos níveis de concentração de lactato indica que há um aumento das taxas de fermentação lática. O ensaio SRB permitiu estimar a densidade celular através da medição do conteúdo proteico, densidade essa que pode, por sua vez ser utilizada para avaliar a proliferação celular. O ensaio clonogénico avaliou a capacidade de uma única célula desenvolver uma colónia, permitindo determinar a sobrevivência celular. Por fim, o ensaio de migração estudou a migração de células cancerígenas in vitro.Resultados: Não foi possível verificar diferenças estatisticamente significativas no efeito do exercício crónico nas células do cancro. Contudo, observou-se uma tendência para uma maior produção de L−lactato nas culturas expostas a soros obtidos após as intervenções, o que parece indicar uma alteração do fenótipo bioenergético. A tendência em quase todos os grupos foi de um aumento de concentrações de L−lactato do M1 para M2. No ensaio SRB, verificou-se uma tendência para a diminuição dos níveis de densidade celular. No ensaio clonogénico, foi notório uma ligeira diminuição da capacidade de formação de colónias, contudo não houve diferenças estatisticamente significativas. No ensaio de migração, verificou-se um aumento de área de migração do M1 para o M2 no grupo aeróbio, tendo acontecido de forma idêntica no grupo intervalado. Conclusão: Apesar de não terem sido observadas diferenças significativas entre as culturas de células A549 expostas a soros colhidos no início ou no final das intervenções com exercício verificaram-se tendências que podem ser clinicamente relevantes nomeadamente uma diminuição na transformação da linha celular cancerígena e na capacidade de formação de colónias.