O efeito de soros condicionados pelo exercício físico numa cultura de células de cancro da mama

Abstract

Purpose: The main objective of the research work presented in this dissertationwas to characterise the effects of combined exercise-conditioned serum on breast cancer cell adhesion and proliferation in pre- and postmenopausal women. The research also studied the effects of exercise-conditioned serum on lactate production and the impact on cisplatin cytotoxicity.Methodology: Six healthy, sedentary women (three pre-menopausal and three post-menopausal, before starting the exercise intervention) underwent a 16-week combined exercise programme (strength and aerobic exercises). The cell line used in the experimental work was MCF-7. The adhesion and proliferation capacity of breast cancer cells and the impact on the cytotoxicity of cisplatin, before and after the exercise programme, was assessed using the sulforhodamine B (SRB) colourimetric assay. Lactate production was analysed using the lactate assay.Results: In the SRB test, after 24 hours of incubation, the absorbance indicating cell adhesion was higher in M1 (0.085) when compared to M2 (0.071), although there were no statistically significant differences between times (p= 0.116). When analysing cell proliferation, after 48 hours there were statistically significant differences between M1 and M2 (p= 0.028) with a higher absorbance indicating cell proliferation in M1 (0.178) compared to M2 (0.148). At 72 hours there were no statistically significant differences between M1 and M2 (p= 0.753). In the lactate test, there were no statistically significant differences between M1 and M2 (p = 0.917). Lactate production was higher in M2 (0.400 mM) compared to M1 (0.386 mM). In the SRB cytotoxicity test with cisplatin, statistically significant differences were observed between M1 and M2 (p = 0 .028) after 24 hours of incubation, with a higher absorbance indicating cell adhesion in M2 (0.190) compared to M1 (0.176). In all the tests carried out, there were no statistically significant differences between pre- and post-menopausal women.Conclusion: The results generally show that the 16-week combined exercise programme led to an average reduction in cell proliferative capacity after 48 hours of incubation. However, serum conditioned by chronic exercise seems to have a protective effect against cisplatin, with an increase in the cell adhesion capacity of MCF-7 cells.

Objetivo: O principal objetivo do trabalho de investigação apresentado nestadissertação foi a caracterização dos efeitos de soro condicionado por um programa de exercício físico combinado na adesão e proliferação de células de cancro da mama, em mulheres na pré e pós-menopausa. A investigação estudou ainda os efeitos de soro condicionado pelo exercício na produção de lactato e o impacto na citotoxicidade da cisplatina.Metodologia: Seis mulheres saudáveis e sedentárias (três na pré-menopausa e três na pós-menopausa, antes de iniciar a intervenção de exercício físico) realizaram um programa de exercício físico combinado de 16 semanas (exercícios de força e aeróbios). A linha celular utilizada nos trabalhos experimentais foi a MCF-7. A capacidade de adesão e proliferação das células de cancro da mama e o impacto na citotoxicidade da cisplatina, antes (M1) e após (M2) o programa de exercício físico, foram avaliadas através do ensaio colorimétrico de sulforodamina B (SRB). A produção de lactato foi analisada através de ensaio enzimático.Resultados: No ensaio SRB após 24 horas de incubação a absorvância indicativa da adesão celular foi superior no M1 (0,085) quando comparada com o M2 (0,071), no entanto não se verificaram diferenças estatisticamente significativas entre momentos (p= 0,116). Na análise da proliferação celular, após 48 horas verificaram-se diferenças estatisticamente significativas entre o M1 e o M2 (p= 0,028) com uma absorvância indicativa da proliferação celular superior no M1 (0,178) quando comparada com o M2 (0,148). Às 72 horas não se verificaram diferenças estatisticamente significativas entre o M1 e o M2 (p= 0,753). No ensaio de lactato não se verificaram diferenças estatisticamente significativas entre o M1 e o M2 (p = 0,917). A produção de lactato foi superior no M2 (0,400 mM) quando comparada com o M1 (0,386 mM). No ensaio de citotoxicidade com cisplatina por SRB observaram-se diferenças estatisticamente significativas entre o M1 e o M2 (p = 0,028) após 24 horas de incubação, com uma absorvância indicativa da adesão celular superior no M2 (0,190) quando comparada com o M1 (0,176). Em todos os ensaios realizados, não se verificaram diferenças estatisticamente significativas entre mulheres na pré e pós-menopausa.Conclusão: Os resultados mostram, de uma forma geral, que o programa de exercício físico combinado de 16 semanas conduziu a uma redução média da capacidade proliferativa celular, após 48 horas de incubação. No entanto o soro condicionado pelo exercício crónico parece ter um efeito protetor contra a cisplatina verificando-se um aumento da capacidade de adesão celular das células MCF-7.