O ESTUDO CITOGENÉTICO E A PESQUISA DE MICRODELEÇÕES DO CROMOSSOMA Y NA INVESTIGAÇÃO ETIOLÓGICA DA INFERTILIDADE PRIMÁRIA MASCULINA

Abstract

A infertilidade masculina é uma patologia de causa multifatorial associada a fatores genéticos e ambientais. Por conseguinte, a sua apresentação fenotípica é altamente heterogénea, incluindo habitualmente disfunção testicular e perturbação da espermatogénese. Quanto mais severo o fenótipo, mais preponderantes são os fatores genéticos na etiologia da patologia. A disfunção da espermatogénese manifesta-se num quadro clínico de azoospermia secretora. Esta é considerada a manifestação mais severa de infertilidade masculina, afetando cerca de 1% da população masculina mundial. Alterações genéticas como as aneuploidias dos cromossomas sexuais, grandes rearranjos estruturais e microdeleções do cromossoma Y têm um papel de relevo na etiologia destes casos. O cariótipo é o teste genético de primeira linha na pesquisa etiológica da infertilidade masculina. A pesquisa de microdeleções do cromossoma Y é recomendada em casos de perturbação da espermatogénese. Efetivamente microdeleções de genes da região AZF (fator de azoospermia) do braço longo do cromossoma Y comprometem a espermatogénese e estão associadas a casos graves de oligozoospermia e azoospermia. Deste modo, este trabalho teve como objetivo avaliar o impacto do estudo citogenético e da pesquisa de microdeleções do cromossoma Y no diagnóstico clínico da infertilidade primária masculina. No âmbito deste estudo foi realizada a análise citogenética e implementada a técnica de Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification (MLPA) para pesquisa das microdeleções do cromossoma Y em casos de infertilidade primária masculina. No decorrer deste estudo foram avaliados 111 casos de infertilidade primária masculina e foram identificadas 11 alterações genéticas causais deste fenótipo, maioritariamente por citogenética convencional. Verificou-se que a aplicação simultânea das metodologias de citogenética e genética molecular permite atingir um maior número de diagnósticos, bem como a melhor caraterização das alterações identificadas. O estudo citogenético mantém-se a metodologia mais relevante nestes quadros clínicos, contudo, a pesquisa de microdeleções do cromossoma Y por MLPA complementa-a por aumento da resolução da análise.

Male infertility is a pathological condition with multifactorial causes associated with genetic and environmental factors. Therefore, its phenotypic presentation is highly heterogeneous, usually including testicular dysfunction and spermatogenesis disturbance. The more severe the phenotype, the more predominant genetic factors are in the etiology of the infertility. The dysfunction of spermatogenesis results in clinical cases of non-obstructive azoospermia. This is considered the most severe manifestation of male infertility, affecting around 1% of the world's male population. Genetic aberrations such as sex chromosome aneuploidies, large structural rearrangements and Y chromosome microdeletions play an important role in the etiology of these cases.The karyotype is the first line of genetic testing in the etiological research of male infertility. The screening for microdeletions of the Y chromosome is recommended in cases of spermatogenesis disturbance. Microdeletions of genes in the azoospermia factor region of the long arm of the Y chromosome compromise spermatogenesis and are associated with severe cases of oligozoospermia and azoospermia. Accordingly, this work aims to evaluate the impact of the cytogenetic study and the screening of Y chromosome microdeletions in the clinical diagnosis of primary male infertility. As part of this study, cytogenetic analysis was carried out and the Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification (MLPA) technique was implemented to screen Y chromosome microdeletions in cases of primary male infertility.In the course of this study, 111 cases of primary male infertility were assessed and 11 genetic alterations causing this phenotype were identified, most of which by classical cytogenetics. It was found that the simultaneous application of these methodologies allows for a greater number of diagnoses to be made, as well as a better characterization of the identified genetic aberrations. The cytogenetic study remains the most relevant methodology in these conditions, however, the search for Y chromosome microdeletions by MLPA complements it by increasing the resolution of the analysis.