Abordagens Citogenéticas e Citogenómicas no Diagnóstico Pré-Natal e Pós-Natal

Abstract

A citogenética impulsionou o diagnóstico em genética humana em contexto Pré e Pós-Natal. Os primórdios da citogenética convencional permitiram o conhecimento de várias síndromes associadas a cromossomopatias. A incorporação de técnicas moleculares, e sua junção com a citogenética, nas áreas de citogenética molecular e citogenómica, permitiram não só o aprofundamento dos mecanismos de doença a nível molecular, assim como diagnósticos mais rápidos e com resolução ao nível do gene. A era genómica chegou não só ao diagnóstico, através de sequenciação de painéis de genes ou exomas, mas também ao rastreio Pré-Natal, com o NIPT. No diagnóstico genético existe uma ligação entre a genética clínica e os laboratórios de genética clínica, uma vez que é preciso esclarecimentos pré e pós-exames. Estes laboratórios devem ser constituídos por uma equipa multidisciplinar em genética, e a aplicação das variadas técnicas, sua interpretação e o reporte de resultados tem de seguir a legislação aplicável assim como as guidelines atualizadas de boas práticas internacionais. A evolução das técnicas genéticas levou a mudanças na abordagem do diagnóstico genético. A técnica de array-CGH tem ganho um papel preponderante no Diagnóstico Pós e Pré-Natal. É disso exemplo a substituição do estudo de cariótipo e do FISH, pelo array-CGH como testes de primeira linha em doentes com défice intelectual. No entanto, ainda não existe um teste único que consiga detetar todos os mecanismos de doença genética, existindo atualmente complementaridade de técnicas para diagnóstico e cálculo de recorrência. A decisão sobre as estratégias de testagem para uma determinada doença genética deve ser baseada no espectro e frequências das diferentes alterações moleculares que lhe estão subjacentes, e na experiência a nível metodológico do laboratório, que engloba o conhecimento das vantagens, limitações e questões éticas de cada técnica. O estágio permitiu acompanhar a atividade assistencial habitual do laboratório LCG-FMUC, em Diagnóstico Pré e Pós-Natal, nas vertentes da citogenética convencional, citogenética molecular, biologia molecular e citogenómica. Ao serem praticadas as várias técnicas e estudo de casos clínicos, houve a compreensão da metodologia, assim como das suas vantagens, limitações e implicações éticas, quando presentes, na resposta a determinada questão clínica.

Cytogenetics boosted diagnosis in human genetics in pre and postnatal contexts. The beginnings of conventional cytogenetics allowed the knowledge of several syndromes associated with chromosomal disorders. The incorporation of molecular techniques, and their combination with cytogenetics, in the areas of molecular cytogenetics and cytogenomics, allowed not only the deepening of disease mechanisms at the molecular level, as well as faster diagnoses and with resolution at the gene level. The genomic era has reached not only diagnosis, through sequencing of panels of genes or exomes, but also prenatal screening, with the NIPT.In genetic diagnosis, there is a link between clinical genetics and clinical genetics laboratories, since pre- and post-exam clarifications are required. These laboratories must be constituted by a multidisciplinary team in genetics, and the application of the various techniques, their interpretation and the reporting of results must follow the applicable legislation as well as the updated guidelines of international good practices.The evolution of genetic techniques has led to changes in the approach to genetic diagnosis. The array-CGH technique has gained a leading role in Post and Prenatal Diagnosis. An example of this is the replacement of the karyotype study and FISH, by the array-CGH as first-line tests in patients with intellectual deficit. However, there is still no single test that can detect all mechanisms of genetic disease, and there is currently the need of complementarity of techniques for diagnosis and calculation of recurrence.The decision on testing strategies for a given genetic disease must be based on the spectrum and frequencies of the different underlying molecular alterations, and on the laboratory's methodological experience, which encompasses knowledge of the advantages, limitations and ethical issues of each technique.The internship made it possible to follow the usual care activity of the LCG-FMUC laboratory, in Pre and Post-Natal Diagnosis, in the areas of conventional cytogenetics, molecular cytogenetics, molecular biology and cytogenomics. By practicing the various techniques and studying clinical cases, there was an understanding of the methodology, as well as its advantages, limitations and ethical implications, when present, in the answer to a certain clinical question.