Quantificação e caracterização fenotípica e funcional das células Th(c)17 e Th(C)1 no sangue periférico de doentes com artrite reumatóide

Abstract

A artrite reumatóide é uma doença sistémica, auto-imume, que pode envolver vários órgãos e sistemas. Pensa-se que nesta, bem como em outras doenças auto-imunes, este processo é mediado por células Th1. Contudo, nos últimos anos, têm sido descrito em vários estudos, uma nova subpopulação de células efectoras, as Th(c)17, produtoras de IL-17, mas o seu papel na fisiopatologia das doenças reumáticas ainda não foi esclarecido. Neste estudo, analisou-se a frequência e a actividade funcional de células Th(c)1 e Th(c)17 produtoras de citocinas pró–inflamatórias (IL-2, TNF-α e IFN-) e ainda a quantidade de cada citocina a nível celular através da citometria de fluxo, após estimulação in vitro, em doentes com artrite reumatóide inactiva ou de baixa actividade (DAS<3,2; n=19) e com actividade moderada a elevada (DAS>3,2; n=13) da doença, comparando com resultados obtidos num grupo controlo (N; n=13). Os resultados obtidos no presente trabalho demonstram uma tendência para um aumento da frequência das células Tc17 nos doentes com artrite reumatóide, particularmente naqueles com actividade da doença elevada, assim como uma maior capacidade das células Th17 para produzirem IL-17. No entanto, nos doentes com artrite reumatóide, observou-se uma diminuição significativa da produção de TNF-α nas células Th(c)17, uma vez mais, preferencialmente no grupo com alta actividade. Também, se observou uma diminuição da produção de quase todas as citocinas pró-inflamatórias em estudo, com excepção da IL-2, pelas Th(c)1. A IL-2 encontrou-se aumentada nos doentes com baixa actividade da doença. Analisando a proporção de células produtoras de citocinas pró-inflamatórias, verificou-se uma polarização no sentido Tc1 nas células T CD8, enquanto nas células T CD4 não se observaram diferenças significativas, a não ser uma diminuição destas células produtoras de IFN-. Os resultados obtidos demonstram que a plasticidade funcional das células Th(c)17 e Th(c)1 parece contribuir para a produção local de citocinas reforçando a sua participação activa e consequentemente seu papel relevante, nomeadamente das células Tc1 e Th(c)17, na fisiopatologia da artrite reumatóide

Rheumatoid Arthritis is a systemic and autoimmune disease, that can involve all organism. Were believed, like other autoimmune diseases, to be mainly driven by Th1 cells. However, in recent years several studies have been described a new subset of effector T cells with the ability to produce IL-17, the Th(c)17 cells, but the involvement of this cells on the pathophysiology of rheumatic diseases it’s not defined. In this study, we analysed the number and functional activity of Th(c)17 and Th(c)1 according to the frequency of pro-inflammatory cytokines (IL-2, TNF- and IFN-) producers cells, as well as their cytokine amount by flow cytometry single cell analysis, after stimulation in vitro, in rheumatoid arthritis patients with a inactive or low disease activity (DAS<3,2; n=19) or with moderate to high disease activity (DAS>3,2; n=13) compared to healthy controls (N, n=13). Results obtained demonstrate a trend to an increase of frequency of Tc17 cell in rheumatoid arthritis patients, particularly in those it high disease activity, as well as one bigger capacity of these cells to produce IL-17. However, in rheumatoid arthritis patients, a significant reduction of the production of TNF-α in Th(c)17 was observed, particularly in patients it high disease activity. A similar decrease was observed in Th(c)1, for almost all studied pro-inflammatory cytokines, with the exception of IL-2, which was increased in Tc1 from low disease activity patients. Analysing the proportion of pro-inflammatory cytokines producer’s cells, a polarization to Tc1 phenotype seemed to occur in CD8 T cells, while CD4 T cells did not significantly differ with this respect and appears even to be decreased in IFN-g producer’s cells. Results demonstrate that functional plasticity of Th(c)17 and Th(c)1 cells seem to contribute to the local cytokine production, strengthening its active participation and pointing an important role, mainly of Tc1 and Th(c)17 cells, in the pathophysiology of rheumatoid arthritis