Please use this identifier to cite or link to this item: https://hdl.handle.net/10316/25003
Title: Embriogénese somática e outros ensaios in vitro em duas espécies de loureiro (Laurus nobilis e Laurus azorica)
Authors: Baptista, Renato Ferreira 
Orientador: Canhoto, Jorge Manuel Pataca Leal
Keywords: Auxina; Estudos histológicos; Gemas caulinares; In vitro; Tecido embriogénico
Issue Date: 2012
Place of publication or event: Coimbra
Abstract: O loureiro (Laurus nobilis L.) é uma árvore ou arbusto da família Lauraceae. Encontra-se distribuído por toda a bacia do Mediterrânico onde as suas folhas são muito utilizadas na culinária. O loureiro-bravo (Laurus azorica (Seub.) Franco) é um arbusto ou árvore da mesma família cuja distribuição está limitada ao arquipélago dos Açores, sendo importante medidas de conservação da espécie, que já foi catalogada no livro vermelho das espécies ameaçadas. Ambas as espécies são dióicas e têm baixas taxas de germinação natural. A propagação por métodos convencionais também não ocorre com facilidade. Assim, estudos de embriogénese somática têm vindo a ser realizados, para implementar um protocolo de multiplicação in vitro destas espécies bem como para compreender melhor a embriogénese somática em lenhosas. A embriogénese somática é uma técnica de Biotecnologia Vegetal com grande potencial para propagação de plantas em larga escala. Neste trabalho tentou-se o estabelecimento das duas espécies quer a partir do material adulto, quer a partir de explantes jovens, tendo em vista o estabelecimento de um protocolo eficiente de micropropagação. Duas auxinas, 2,4-D e Picloram, em diferentes concentrações, foram testadas na indução de embriogénese somática. A análise histológica efectuada em diferentes fases da resposta embriogénica mostrou que a fraca germinação obtida em estudos anteriores, poderá dever-se às poucas reservas acumuladas pelos embriões somáticos, bem como à ausência de SAM em algumas secções de embriões somáticos. A resposta mais comum foi a formação de calos embriogénicos, tendo sido testados vários meios para promover o seu desenvolvimento em embriões somáticos. A verificação da capacidade embriogénica em tecidos embriogénicos obtidos há treze anos em L. nobilis foi outro dos estudos efectuados, tendo-se verificado uma perda do potencial deste tecido evoluir em embriões somáticos. Apesar de a obtenção de embriões somáticos não ter sido conseguida, a acção do inibidor fluoridona foi interessante pela desdiferenciação que provocou no tecido embriogénico, tendo análises citológicas comprovado que o tecido proveniente da acção da fluoridona apresentava células com características meristemáticas, ao invés de todos os outros que apresentavam células com algum grau de diferenciação. A embriogénese somática repetitiva é a obtenção de embriões somáticos secundários utilizando embriões somáticos primários como explante. A embriogénese secundária em L. azorica foi conseguida neste trabalho tendo sido utilizado o mesmo protocolo de L. nobilis já descrito na literatura.
The laurel (Laurus nobilis L.) is a tree or shrub of the family Lauraceae. The species is distributed throughout the Mediterranean basin where the leaves are widely used as a condiment. The wild laurel (Laurus azorica (Seub.) Franco) is also a shrub or small tree of the same family limited to the Azores islands being important to adopt measures of conservation for the species, which has been referenced in the red book of endangered species. Both species are dioecious and have low germination rates. The propagation by conventional methods of vegetative propagation is also difficult. Thus, studies of somatic embryogenesis have been carried out to implement a protocol for in vitro multiplication of these species as well as to better understand somatic embryogenesis in woody species. Somatic embryogenesis is a technique commonly used in Plant Biotechnology with great potential for large scale plant propagation. In this work we tried to establish the two species either from adult material, or from young explants in order to establish an efficient protocol of micropropagation. Two auxin, 2,4-D and Picloram, at different concentrations were tested for somatic embryogenesis induction. Histological analysis carried out in different stages of the embryogenic response showed that the low germination obtained in previous studies may be related to poor reserve deposition in somatic embryos as well as the absence of SAM in somatic embryos. The most common response was the formation of embryogenic callus, and different media were tested to promote their development into somatic embryos. The verification of the embryogenic capacity in embryogenic tissues, obtained thirteen years ago from L. nobilis, was other study carried out. A loss of the embryogenic potential of this tissue to evolve into somatic embryos was found. Although somatic embryos were not obtained, it was found that the ABA inhibitor fluridone promotes the dedifferentiation of the embryogenic tissue, and cytological analyses showed the appearance of meristematic cells in this. Repeated somatic embryogenesis is the formation of secondary somatic embryos, using primary somatic embryos as explants. Secondary embryogenesis in L. azorica was achieved in this work using a protocol similar to that developed for L. nobilis already described in literature.
Description: Dissertação de mestrado em Biodiversidade e Biotecnologia Vegetal apresentada ao Departamento Ciências da Vida da Faculdade de Ciências e Tecnologia da Universidade de Coimbra.
URI: https://hdl.handle.net/10316/25003
Rights: openAccess
Appears in Collections:UC - Dissertações de Mestrado
FCTUC Ciências da Vida - Teses de Mestrado

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